TB Broth – podłoże rekomendowane do ekspresji białek w E. coli

TB Broth to suche, proszkowe podłoże hodowlane w butelkach po 250 g, zaprojektowane specjalnie z myślą o wysokowydajnej ekspresji białek w szczepach Escherichia coli. Dzięki zoptymalizowanemu składowi TB medium znacząco zwiększa uzyski białka w porównaniu ze standardowymi bulionami, a jednocześnie zapewnia stabilne warunki wzrostu komórek. Podłoże jest rekomendowane do różnorodnych metod indukcji ekspresji, w tym z użyciem IPTG, arabinozy czy maltozy, oraz znajduje zastosowanie w resuscytacji i przechowywaniu liofilizowanych szczepów bakteryjnych wykorzystywanych w biologii molekularnej.

Skład TB Broth i przygotowanie pożywki

Formuła TB Broth oparta jest na bogatym w składniki odżywcze zestawie komponentów: na 1 litr gotowej pożywki przypada 12,0 g tryptonu, 24,0 g yeast paste (ekstraktu drożdżowego), 2,3 g fosforanu potasu jednosodowego (KH₂PO₄) oraz 12,5 g fosforanu potasu dwusodowego (K₂HPO₄), przy końcowym pH 7,2 ± 0,2 w 25°C. Aby przygotować 1 L medium, należy odważyć 50,9 g proszku, rozpuścić go w wodzie destylowanej przy ogrzewaniu, następnie dodać 4 mL glicerolu, rozlać pożywkę do odpowiednich naczyń i wysterylizować w autoklawie w temperaturze 121°C przez 15 minut. Tak przygotowane TB Broth zapewnia komórkom wysoką dostępność źródeł węgla, azotu, witamin i buforów fosforanowych, co przekłada się na szybki wzrost i dużą gęstość optyczną kultur bakteryjnych.

Wydajność, kontrola jakości i warunki przechowywania

TB Broth został zwalidowany w testach porównawczych z podłożami TB przygotowanymi z surowców innych marek (Brand O i Brand S), przy jednakowych warunkach hodowli szczepu E. coli DH5α z plazmidem pUC19; podłoże Biologix zapewniło wyższe średnie uzyski kwasu nukleinowego, przy zachowaniu bardzo dobrych stosunków A260/280 i A260/230, co potwierdza jego przydatność w wymagających zastosowaniach związanych z ekspresją białek i pracą z plazmidami. Środek należy przechowywać w temperaturze 2–30°C, w oryginalnym, szczelnie zamkniętym opakowaniu; po każdym użyciu zaleca się natychmiastowe dokręcenie nakrętki, aby chronić proszek przed wilgocią. Okres trwałości TB Broth wynosi 36 miesięcy od daty produkcji, co umożliwia bezpieczne planowanie długoterminowych serii eksperymentów w laboratoriach badawczych i produkcyjnych.